1.除菌过滤基础知识
除菌过滤是指采用物理截留的方法除去气体或液体中的微生物,以达到无菌要求的过程。除菌级过滤器每平方厘米有效过滤面积可以截留≥10 7CFU的缺陷短波单胞菌的过滤器,工艺上常用0.22um(更小孔径或相同过滤效力)的除菌级过滤器。过滤分为常规过滤(NFF)也称死端过滤和切向流过滤,除菌过滤属于常规过滤。
2.除菌过滤器种类
选择滤膜时,首先要考虑其化学相容性。滤膜是否耐酸、碱、有机溶剂等。常见的滤膜材质有:
① 水系滤膜
PES(聚醚砜):亲水性膜、高流速、高通量、低蛋白吸附性、低萃取性。是最佳的细胞和组织培养基滤膜。
CA(醋酸纤维素酯膜): 滤膜对多数大分子的亲和力非常低,尤其适用于要求低蛋白结合作用的实验,如含血清培养基的过滤。一般适用于过滤水溶液和蛋白质及其相关样品的过滤,还适用于低分子醇类、油脂类的过滤。
MCE(混合纤维素):具有很好的亲水性、较高的孔隙率高和过滤速度,强度高、生物学惰性良好、化学性能稳定。一般用于适合于生物样品中的蛋白质和水溶液的过滤。
② 有机系滤膜
NY(尼龙膜):良好的化学稳定性和柔韧性、耐用、极好的耐酒精性,适合不含蛋白的水溶液和有机溶液等,耐酒精和DMSO等。
③ 通用型滤膜
PVDF:机械强度高、低蛋白吸附性、良好耐热性和化学稳定性。有亲水和疏水两种:疏水主要用于气体和蒸汽的过滤、高温液体过滤;亲水主要用于组织培养基等的过滤,适合低浓度的蛋白稀释液。
PTFE:具有通量大、高微粒截留率、耐温性好,抗强酸、碱、有机溶剂和氧化剂,适用于强腐蚀性溶液,有机溶液和气体的过滤。
④ 其他种类过滤材质:
在平常实验中我们使用以上几种材质就能满足实验需求了,但其实还有一些其他种类的过滤材质:
PP(聚丙烯):一种天然疏水性过滤介质,耐酸碱、耐磨损、耐冲击、微孔分布均匀、过滤面积大、透水性好。所以PP材质可以用于颗粒含量高的有机溶剂的过滤。
3.滤膜孔径
① 分离膜包括:反渗透膜(0. 0001~0. 001μm),纳滤膜(0. 001~0. 01μm)超滤膜(0. 01~0. 1μm),微滤膜(0. 1~10μm)。
② 滤膜孔径选择:孔径、材质、处理体积
▶0.1μm:能去除样品中的支原体。
▶0.2μm:可以去除99.99%的细菌微生物,达到GMP或者药典的除菌要求,还可以去除样品、流动相中极细微的颗粒。
▶0.45μm:能滤除大多数细菌微生物,对常规样品、流动相等的过滤,能满足一般色谱要求。
▶0.8μm及以上:可以过滤较大颗粒的杂质或者难处理、浑浊样品的预处理,经预处理后再选择相应滤膜进行过滤。
4.赛多利斯Minisart@针头滤器
赛多利斯提供的Minisart@针头过滤器应用范围非常广泛。该过滤器几乎没有溶出物和析出物,非常清洁安全。它还能够可靠地清除颗粒和微生物,且无任何渗漏。配有聚丙烯外壳的Minisart@针头过滤器,特别适合于样品分析前的过滤处理,甚至能够承受严酷的溶剂和化学制品。另一类Minisart@外壳采用医疗级丙烯酸制成,这使其成为添加剂、缓冲剂、试剂、药物及气体的无菌过滤与净化的完美选择。

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