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如何利用磁珠快速进行细胞分选?(二)分选器及分选柱

183 人阅读发布时间:2025-03-28 10:15

分选柱的选择

分选柱工作原理

当 MACS柱置于磁场(例如 MACS 分选器)中时,分选柱内的球体会产生均匀的磁力。球体之间的空间约为淋巴细胞大小的 20 倍,强磁场可将标记细胞轻柔地包裹在柱内。另一方面,未标记的细胞可以自由通过,不会受到伤害和挤压。从磁场中移除磁柱后,标记细胞就能顺利释放出来,随时可以收集起来作进一步应用。

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使用 MACS 柱实现灵活的流速

我们可提供各种不同的分选柱,可以满足不同的实验设置、所需的分选策略和特定应用。不同的分选柱结合不同的流速,让您可以自由设计最佳策略,精确分离出所需的细胞。选择较慢的流速会增加标记细胞的保留率,而较快的流速则会减少标记细胞的保留率。

对于手动分离,您可以通过选择不同的分选柱来灵活调节流速,而对于自动分离,则可以通过优化流速来管理流速。这种方法使我们能够为各种要求和应用提供量身定制的解决方案。

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MACS分选柱提供灵活的流速,使您能够自定义细胞分离过程,并调整纯度和回收率之间的相互作用。

选择分选柱需要考虑以下几个问题:

您要分选多少细胞?

每种分选柱的最大磁性细胞吸附量和最大细胞上样量是有差别(具体可见下表),应根据您的细胞量进行选择。

不同分选柱的比较

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您要分选常见细胞还是稀有细胞?

为了在分选稀有细胞(表达频率<5%)过程中得到更高的纯度,应该使用两个分选柱:用一根分选柱做第一次分选;阳性成分再过一次新的分选柱。阳性分选中连续使用2个分选柱,可以获得更高的分选纯度。

您是否分选大体积的细胞?

如果您要分选的目的细胞是体积较大的特殊细胞,如原生动物细胞、人皮肤郎罕式细胞、鼻咽癌细胞、心肌细胞等,那推荐您使用Large cell column。因为大细胞柱的铁珠间隙足够大,容许这些特殊的大体积细胞顺利通过。 

当然,MACS的磁珠说明书中关于分选柱和分选器也有详细的推荐,也可参考选择。

分选器的选择

MiniMACS™ 和 OctoMACS™ 分选器

MiniMACS™ 分选器只适合一根分选柱,因此非常适合小规模细胞分离。相比之下,OctoMACS™ 分选器可同时分离多达八个样品。两种分选器均与 MS 分选柱、Large cell column和 M分选柱兼容。

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MidiMACS™ 和 QuadroMACS™ 分选器

MidiMACS™ 和 QuadroMACS™ 分选器是使用 LS分选柱、LD分选柱或全血分选柱时的完美选择。MidiMACS 分选器可为一个分选柱提供空间,而 QuadroMACS™ 分离器可同时分离多达四个样品。

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SuperMACS™ II分选器

为大规模细胞分离而开发,SuperMACS™ II分选器可与任何MACS分选柱结合使用,用于手动细胞分离。

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