酶标仪(微孔板读板机)是一种常见的实验仪器,主要用于测量微孔板孔内的化学反应、生物反应及相关特性。
传统酶标仪是指具备吸收光检测功能的酶联免疫检测仪,随着光学技术的发展和试剂类型的不断丰富,如今酶标仪所具备的检测功能日益丰富,在光吸收检测(Abs)基础上增加了荧光强度(FI)、发光检测(Lum)、荧光偏振(FP)、时间分辨荧光(TRF)、Western-Blot检测、均相时间分辨荧光(HTRF),AlphaScreen/AlphaLISA等多种检测技术,每一种技术都具有独特的应用价值。
一、酶标仪分类
1. 基于滤光方式不同可分为:滤光片式酶标仪、光栅式酶标仪。
2. 按功能划分可分为:光吸收酶标仪、化学发光酶标仪、荧光酶标仪、多功能酶标仪。
① 光吸收酶标仪:是用来进行可见光与紫外光吸光度的检测,特定波长的光通过微孔板中的样品后,光能量被吸收,而被吸收的光能量与样品的浓度呈一定的比例关系,由此可以用来定性和定量的检测,光吸收的检测技术成熟,成本低,操作简单,但是动态范围窄,灵敏度比较低,特异性不强,一般可见光和紫外光分别采用钨灯及氘灯作为光源,而紫外/可见酶标仪是可以将两种光源进行切换,适应不同测量波长的需求。
② 荧光酶标仪:是用来进行荧光的检测,通过激发光栅分光后的特定波长的光照射到被荧光物质标定的样品上后,会发出波长更长的发射光,通过发射光栅后到达检测器,荧光的强度与样品的浓度呈一定的比例,荧光检测灵敏度高,可实时检测,使用方便,检测模式多样,但是容易受外界干扰,激发光与发射光容易互相影响,干扰检测。
③ 化学发光酶标仪:是来自生物化学反应中的自发光,可分为辉光型和闪光型两种类型,辉光型发光持久,稳定,能持续一段时间;闪光型发光时间短,变化快,稳定性不强,需要应用自动加样器才可以进行,化学发光中发出的光子数与样品量呈一定比例关系,化学发光酶标仪灵敏度非常高,动力学范围广。
④ 多功能酶标仪:以上三种酶标仪的集合,它集成了两种或者三种酶标仪于一体,可以同时进行光吸收,荧光和化学发光的检测,功能强大,使用范围广,可作为研究平台,避免了重复购买,另外根据通道的个数,可以将酶标仪分为单通道和多通道两种类型,单通道又有自动和手动两种之分。
二、酶标仪常见应用
PART 01光吸收常见应用
1. DNA/RNA含量测定常用于快速检测质粒DNA浓度。
2. ELISA(酶联免疫吸附试验)检测方法多(间接法、竞争法、双抗夹心法)
3. 细胞活力检测MTT\XTT等酶活动力学检测。
光吸收法优缺点:
1. 优点:灵敏、特异性、简单、快速、对环境没污染、稳定易于自动化操作等。
2. 不足:降低灵敏度(针对新方法其易受到杂质干扰)、动态范围比较窄(3数量级),步骤繁琐(清洗步骤多)。
PART 02化学发光检测
1. 单/双荧光素酶报告基因、BRET。
2. 细胞活力检测、细胞增殖检测、支原体检测、细胞毒性检测、ATP、dsDNA、水母发光蛋白Ca2+。
3. 基于化学发光的ELISA检测等。
PART 03荧光检测
1. 生物大分子(DNA/RNA或蛋白质)。
2. 免疫荧光(荧光标记物,如GFP\YFP\CFP等)
3. 细胞学分析(细胞增殖、细胞毒理、细胞迁移、细胞吸附、细胞渗透)
4. 线粒体膜电位分析。
5. 钙流检测。
三、Thermo酶标仪选型
Thermo Scientic™ 酶标仪应用灵活、性能优异、简 单易用,广泛适用于各类基于微孔板的实验。无论是测量荧光、吸收光、化学发光或时间分辨荧光, 还是进行AlphaScreen™ 检测,我们都可根据您的特定工作流程需求提供个性化的酶标仪解决方案。
01 光吸收检测:Thermo Scientific™ Multiskan™ FC 酶标仪
一款基于滤光片的耐用可靠仪器,适 用于一系列常规研究和应用。既可单 机使用,也可通过直观的Skanlt软件联机使用。
☑ 应用广泛,包括ELISA、内毒素检测、细胞毒性检测和生长曲线分析等
☑ 可进行振荡和最高可到50°C的孵育检测
☑ 具有专利的光学设计和自诊断功能,性能稳定、结果可 靠、重复性好
Thermo Scientific™ Multiskan™ SkyHigh 全波长酶标仪
简单易用,适合所有光吸收和浊度研究应用,尤其是核酸和蛋白分析。可选图形化触摸屏,支持多种连接方式(USB、计算机或云端传输)。
☑ 支持动力学、光谱扫描、终点法和动力学光谱扫描测定
☑ 提供三种不同配置:1)触屏型号;2)具有比色皿和触屏型号;3)无触屏型号,需通过Skanlt计算机软件联机操作
☑ 触屏型号简单易用,单机操作十分方便。提供预设的操 作步骤,方便进行基于UV的核酸和蛋白质定量以及比色法蛋白质定量
02 荧光检测:Thermo Scientific™ Fluoroskan™ 微孔板荧光分析仪
性能出色,非常适合荧光蛋白和酶研究、分子互作研究、荧光法核酸定量, 以及报告基因、荧光激酶、免疫学及细 胞检测等生命科学研究。
★ 无论顶读还是底读均具有高灵敏度
★ 内置分液器可精确启动动力学反应
★ 最多可配备三套试剂分液器进行快速动力学检测,如 Ca2+流检测
03 化学发光检测:Thermo Scientific™ Luminoskan™ 微孔板化学发光分析仪
紧凑实用,孔板类型通用性好、读板速度快并支持多达三套分液器,适用于多种化学发光研究应用。兼顾简便性和可靠性,提升工作流程效率。
★ 具有动力学应用所必需的快速读板速度
★ 内置分液器可精准启动动力学反应
★ 能在18秒内完成96孔板读数,满足酶动力学研究和吞噬 作用检测的基本要求
04 荧光和化学发光检测:Thermo Scientific™ Fluoroskan™ FL 微孔板荧光和化学发光分析仪
性能出色,非常适合生命科学领域荧光检测和化学发光检测。孔板通用性好、读板速度快并支持多达三套分液器。
★ 无论顶读还是底读均具有高灵敏度
★ 具有动力学应用所必需的快速读板速度
★ 内置分液器可精准启动动力学反应
★ 检测通用性好,可在同一孔中进行荧光GFP测定和发光荧光素酶快速测定
05 多种光学检测:Thermo Scientific™ Varioskan™ LUX 多功能酶标仪
提供一系列灵活的测量模式,满足多 样化的需求。标配自动化动态范围选择功能简化测量设置,同时借助智能 化安全控制帮助避免实验出错,树立 了可靠性和易用性的新标杆。
★ 五种检测模式:吸光度、荧光、化学发光、时间分辨 (TRF)和AlphaScreen模块
★ 五种测量模式:终点法、动力学、光谱扫描、多点扫描 和动力学-光谱扫描
★ 通过光谱扫描优化检测
★ 可从开始便将分液与检测同步进行,实现快速反应
★ 集成CO2 和O2 气体控制模块
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